簡要描述:Cellulose DE-32 DEAE 纖維素 DE-32小離子電量:0.88~1.08meg/dg(dg=dry gram,千克重) 蛋白容積:700mg/dg(蛋白體(ti) 積是指0.01M ph8.5磷酸緩衝(chong) 液—牛血清白蛋白)蛋白容積/柱體(ti) 積:140mg/ml每升所需的離子交換劑㎏柱床體(ti) 積:0.24(離子交換劑重量的數字考慮到溶脹,容易去除及使用過程中離子離子交換剩餘(yu) 顆粒)
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Cellulose DE-32 DEAE 纖維素 DE-32
產(chan) 品信息:
中文名稱:DEAE纖維素DE-32
英文名稱:DEAE cellulose DE-32;DEAE-Cellulose microgranular
其他名稱:二乙氨基乙基纖維素32;2-(二乙氨基)乙迷纖維素32
CAS號:9013-34-7
級別:柱層析
功能團:二乙氨乙基
正常PH範圍:2~9.5
小離子電量:0.88~1.08meg/dg(dg=dry gram,千克重)
蛋白容積:700mg/dg(蛋白體(ti) 積是指0.01M ph8.5磷酸緩衝(chong) 液—牛血清白蛋白)
蛋白容積/柱體(ti) 積:140mg/ml
每升所需的離子交換劑㎏柱床體(ti) 積:0.24(離子交換劑重量的數字考慮到溶脹,容易去除及使用過程中離子離子交換剩餘(yu) 顆粒)
填料密度:0.20dg/ml(填料密度的狀態為(wei) 0.05M PH7.5磷酸緩衝(chong) 液)
性狀(以下信息僅(jin) 供參考):白色或微黃色顆粒狀或纖維狀。為(wei) 中等堿度陰離子交換劑。對高相對分子質量聚合電解質有較好的解析。遊離堿型。典型吸收值 (胰島素相對分子質量12000)850mg/g、(牛血清蛋白)660mg/g。
用途:本品僅(jin) 供科研,不得用於(yu) 其它用途。(以下用途僅(jin) 供參考)用於(yu) 柱色譜分析,用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等,陰離子交換填料
Cellulose DE-32 DEAE 纖維素 DE-32
米兰官方下载入口裝填
1)組裝柱(如有需要連接裝柱器)。
2)取下下柱頭用裝柱緩衝(chong) 液衝(chong) 洗柱底適配器,排除篩網下麵的氣泡,將下柱頭安裝
在米兰官方下载入口底部,旋緊調整旋鈕,並在米兰官方下载入口底部保留 1cm 左右高度的液體(ti) 。
3)用裝柱緩衝(chong) 液重懸介質,製成 50%~75%左右的介質懸浮液。
4)一次性將介質倒入柱管中,避免產(chan) 生氣泡。
5)如連接有裝柱器,立即往裝柱器中緩慢加入裝柱緩衝(chong) 液。將適配器或裝柱器上蓋
與(yu) 層析係統相連接。
6)設定所需流速+,打開柱下端,啟動泵,進行壓柱。
7)柱床穩定後保持 30min 以上,關(guan) 閉泵和底閥。
8)如連接有裝柱器,移除裝柱器後連接適配器。
9)調節適配器,使其固定在膠麵上 0.5~1cm 處,並保證適配器入口充滿液體(ti) 。
10)打開底閥,連接泵,繼續用設定的流速(注意壓力不要超過 0.3Mpa)繼續壓柱
待膠麵高度保持不變,標記此時膠麵高度
11)暫停機器,關(guan) 閉底閥,斷開柱頭入口,調低適配器至膠麵下 3~5mm 處。封閉
上柱口,裝柱完成。
6、柱效測定
裝填好的米兰官方下载入口可以通過測柱效的方式來評價(jia) 裝柱效果。
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| 製指示劑溶液和流動相。 |
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| 丙酮法測柱效 | NaCl法測柱效 | ||
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| 樣品 | 1.0% ( v/v ) 丙 | 2M NaCl(溶於(yu) 水) | ||
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| 酮水溶液 |
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| 樣品體(ti) 積 | 1.0%柱體(ti) 積 | 1.0%柱體(ti) 積 | ||
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| 流動相 | 水 | 0.4M NaCl水溶液 | ||
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| 流速 | 30 cm/h | 30cm/h | ||
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| 檢測器 | UV 280 nm | 電導率 | ||
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根據UV或者電導率曲線計算理論踏板高度(HETP)、理論塔板數(N)和非對
稱因子(As),公式如下:
HETP=L/N
N=5.54(VR/Wh)2
其中:VR=保留體(ti) 積
Wh=半高峰寬
L=柱高
N=理論塔板數
VR和Wh的單位應*;
As=b/a
其中:
a= 在10%峰高處的*個(ge) 半
b= 在10%峰高處的第二個(ge) 半
結果評價(jia)
由以上公式計算出的 HETP 的數值若小於(yu) 三倍介質平均顆粒大小 且非對稱因子在 0.8~1.8 則判定為(wei) 米兰官方下载入口狀態良好。對於(yu) 不理想的 柱效需要分析原因甚至需要重新裝填米兰官方下载入口。
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