① 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使Vision色譜柱從(cong) 高處掉下都會(hui) 影響柱內(nei) 的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(hui) 衝(chong) 動柱內(nei) 填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩(如前所述)。
② 應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從(cong) 有機溶劑改變為(wei) 全部是水,反之亦然。
③ 一般說來Vision色譜柱不能反衝(chong) ,隻有生產(chan) 者指明該柱可以反衝(chong) 時,才可以反衝(chong) 除去留在柱頭的雜質。否則反衝(chong) 會(hui) 迅速降低柱效。
④ 選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前麵連接一預柱,分析柱是鍵合矽膠時,預柱為(wei) 矽膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被矽膠"飽和",避免分析柱中的矽膠基質被溶解。
⑤ 避免將基質複雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nei) ,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和Vision色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
⑥ 經常用強溶劑衝(chong) 洗Vision色譜柱,清除保留在柱內(nei) 的雜質。在進行清洗時,對流路係統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體(ti) 積應是柱體(ti) 積的20倍左右,即常規分析需要50~75ml。
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