分離效果是評判Platinum色譜柱好壞的重要指標

 　　色譜柱是色譜分離係統的心髒，在色譜分離係統中用來分離檢測樣品，起著*的作用。如何看色譜柱的好壞，我們可以從分離效果來入手。本文小編給大家介紹下Platinum色譜柱分離效果的鑒定方法。

　　Platinum色譜柱的分離效率由理論塔板數(簡稱柱效，N)判定，柱效取決(jue) 於(yu) 固定相的種類、性質(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長、流動相的種類和流速及測定柱效所用物質的性質。N如果峰形對稱並符合正態分布，可近似表示為(wei) ：N=16(Tr/W)^2=5.54(Tr/W(1/2))^2=L/H，顯然，N值越大，或H值越小，柱效越高。因此，分離效果主要取決(jue) 於(yu) 所選擇的固定相。

　　固定相的選擇對樣品的分離起著重要作用，在色譜分離中固定不動，使樣品保留並使之分離。不同類型的色譜采用不同的固定相，如氣-固色譜的固定相為(wei) 各種具有吸附活性的固體(ti) 吸附劑;氣-液色譜的固定相是載體(ti) 表麵塗漬的固定液，液相色譜中的固定相為(wei) 各種鍵合型的矽膠小球，離子交換色譜中的固定相為(wei) 各種離子交換劑，排阻色譜中的固定相為(wei) 各種不同類型的凝膠等，常見的吸附柱填料為(wei) 矽膠柱。

　　Platinum色譜柱的性能除了與(yu) 固定相性能有關(guan) 外，還與(yu) 填充技術有關(guan) 。必須指出，液相色譜柱的獲得，裝填技術是重要環節，但根本問題還在於(yu) 填料本身性能的優(you) 劣，以及配套的色譜儀(yi) 係統的的結構是否合理。

　　柱效受柱內(nei) 外因素影響，為(wei) 使Platinum色譜柱達到*效率，柱外死體(ti) 積要小外，還要有合理的柱結構(盡可能減少填充床以外的死體(ti) 積)及裝填技術。即使的裝填技術，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的，靠近管壁的部位比較疏鬆，易產(chan) 生溝流，流速較快，影響衝(chong) 洗劑的流形，使譜帶加寬，這就是管壁效應。這種管壁區大約是從(cong) 管壁向內(nei) 算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜係統中，柱外效應對柱效的影響遠遠大於(yu) 管壁效應。

　　評判Platinum色譜柱的好壞，使用前都要對其性能進行考察，使用期間或放置一段時間後也要重新檢查。柱性能指標包括在一定實驗條件下下的柱壓、理論塔板數、對稱因子、容量因子和選擇性因子的重複性，或分離度。一般說來容量因子和選擇性因子的重複性在±5%或±10%以內(nei) 。進行柱效比較時，還要注意柱外效應是否有變化。具體(ti) 操作方法如下：

　　1.在進行樣品檢測前，至少使用20倍柱體(ti) 積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩衝(chong) 液應當天配製以保持新鮮避免細菌產(chan) 生。

　　2.流動相使用前需用微孔濾膜過濾，消除流動相中顆粒對色譜係統和色譜柱的損壞。緩衝(chong) 液與(yu) 其他流動相混合後應重新過濾避免溶解度變化造成產(chan) 生新的沉澱。不應使用純水作為(wei) 流動相衝(chong) 洗C18色譜柱，以免柱性能損壞。

　　3.流動相需脫氣後使用，可避免因氣泡導致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與(yu) Platinum色譜柱保存使用的流動相有較大區別，應該使用過度分布的形式進行平衡。避免由於(yu) 流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩衝(chong) 鹽結晶造成對色譜柱和儀(yi) 器係統的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。

　　評判Platinum色譜柱的好壞可以通過以上指標來考慮。